Как определить группы крови с помощью цоликлонов? Насколько точен результат?

Определение группы крови цоликлоныОпределение группы крови — важное лабораторное исследование, которое показано людям перед любыми операциями, а также беременным, военным, водителям транспортных средств и другим группам лиц, которым в любое время может потребоваться переливание крови.

Существует много техник проведения этого анализа, но самым быстрым и простым способом считается определение группы крови с помощью цоликлонов.


Принцип действия цоликлонов

Цоликлоны — специальные реагенты для определения группы крови, которые были разработаны в Центральном Ордена Ленина Институте Переливания Крови в Москве (ЦОЛИПК), откуда и получили свое название. Их изобретение позволило отказаться от более сложного и времязатратного метода стандартных сывороток.

Для того, чтобы понять, как работают цоликлоны, необходимо знать, чем группы крови отличаются друг от друга. В основе их различия лежит наличие или отсутствие на поверхности эритроцитов особых веществ, называемых агглютиногенами.

Определение группы кровиВсего существует два типа агглютиногенов, которые обозначаются буквами A и B.

У людей с первой группой крови агглютиногенов нет вообще, поэтому ее обозначают цифрой 0. Вторая группа крови подразумевает наличие агглютиногена A и обозначается соответствующей буквой.

Подобным же образом присутствие агглютиногена B относит кровь к третьей (B) группе. Ну а если в крови человека содержатся сразу оба агглютиногена, то ее обозначают буквами AB и называют четвертой.

Именно на основе этой несложной схемы разработан принцип действия цоликлонов.

Цоликлоны — это жидкости, содержащие вещества, которые способны вступать в реакцию с тем или иным агглютиногеном и вызывать при этом свертывание исследуемой крови. Цоликлон, показывающий таким образом наличие агглютиногена A, называется Анти-A и имеет красный цвет.

Вторая жидкость, способная сворачивать кровь с агглютиногеном B, является цоликлоном Анти-B и имеет синюю окраску. Существует также бесцветный цоликлон Анти-AB, представляющий собой смесь Анти-A и Анти-B цоликлонов и необходимый в некоторых случаях для подтверждения полученного результата. Жидкости выпускаются в стеклянных флаконах либо в пластиковых с капельницей, что облегчает их использование.

Алгоритм действий при анализе

Определение группыДля проведения анализа на группу крови с помощью цоликлонов понадобится только планшет (любая чистая плоская пластина достаточного размера, например, тарелка), цоликлоны и две капли крови.

Для проведения исследования подходит почти любая кровь: взятая в консервант или без консерванта, из вены или из пальца.

Прежде чем начать работу, нужно пометить на планшете, с какой стороны какой цоликлон будет нанесен, иначе есть риск спутать их результаты.

Затем необходимо нанести по одной большой капле каждого цоликлона (Анти-A обычно капают с левой стороны, а Анти-B — с правой). Далее к каждой капле добавляют по одной небольшой капле крови. Капля крови должна быть примерно в 10 раз меньше по размеру, чем капля цоликлона. После этого планшет нужно аккуратно покачать, чтобы жидкость и кровь перемешались, но так, чтобы разноименные цоликлоны не смешались между собой.

При наблюдении за результатом анализа в течение нескольких минут можно увидеть либо равномерное перемешивание крови и цоликлона, либо реакцию агглютинации, то есть склеивания эритроцитов и свертывания крови. В этом случае становится видно, как эритроциты сначала соединяются в мелкие комочки, а затем выпадают хлопьями. Остается только интерпретировать полученные результаты.

  1. Реакция агглютинации не произошла ни в одной из капель — определяется первая (0) группа крови
  2. Кровь свернулась только с цоликлоном Анти-A — на планшете вторая (A) группа
  3. Свертывание крови произошло в капле с Анти-B — мы исследовали кровь третьей (B) группы
  4. Эритроциты выпали в осадок при соприкосновении с обоими цоликлонами — мы имеем дело с четвертой (AB) группой крови.

Однако в этом случае следует подтвердить полученный результат двумя дополнительными пробами. Для начала каплю исследуемой крови смешивают с цоликлоном Анти-AB, произошедшая при этом реакция агглютинации подтвердит наличие агглютиногенов A и B в исследуемой крови.

Также следует исключить неспецифическое склеивание эритроцитов, которое проявляется в агглютинации кровяных телец в любом растворе и возникает при некоторых тяжелых заболеваниях. Для этого каплю крови смешивают с обычным физиологическим раствором натрия хлорида, отсутствие реакции подтвердит четвертую (AB) группу крови.

Важные моменты

Метод определения группы крови с помощью цоликлонов является достаточно точным. Неверные результаты анализа чаще всего бывают вызваны ошибками, допущенными при его проведении. Для того, чтобы избежать их, необходимо учитывать несколько важных моментов.

  1. Цоликлоны обязательно должны храниться в холодильнике при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия. Более того, вскрытый флакон можно хранить там только в течение месяца, плотно закрытым. При несоблюдении этого правила реагенты могут поменять свои свойства, поэтому нельзя использовать просроченные или неправильно хранившиеся цоликлоны.
  2. Анализ должен проводиться при хорошем освещении и температуре воздуха в помещении от 15 до 25 градусов. Если жаркая погода не позволяет соблюсти нужный температурный режим, то исследование необходимо провести на охлажденном планшете.
  3. Необходимо четко знать, в какой капле находится цоликлон Анти-A, а в какой — Анти-B, именно для этого планшет обязательно следует подписать маркером или карандашом по стеклу. Несмотря на то, что жидкости различаются по цвету, после смешивания с кровью это отличие становится не так очевидно, и есть риск запутаться.
  4. Капля крови не должна быть слишком большой или маленькой, идеальное соотношение крови и цоликлона 2:10 — 3:10. При слишком большом количестве эритроцитов реакция агглютинации может быть недостаточно заметной, а при недостатке она будет происходить очень медленно.
  5. Жидкости из двух исследуемых капель ни в коем случае не должны соприкасаться между собой. Если это все же произошло, нужно провести исследование заново.
  6. Если вы используете стеклянные палочки для смешивания крови и цоликлона, то они должны быть индивидуальными для каждой капли.
  7. Продолжительность наблюдения за реакцией агглютинации должна быть не менее 3 минут, а при возникающих сомнениях — все 5. Несмотря на то, что склеивание эритроцитов происходит уже в течение первых 10 секунд, не стоит делать поспешные выводы, увидев агглютинацию в одной из капель.

Продолжив наблюдение, вы можете, к своему удивлению, заметить замедленную реакцию и со вторым цоликлоном, если у исследуемой крови есть свои особенности. Однако по прошествии слишком большого времени может произойти подсыхание крови и естественное оседание эритроцитов, поэтому таким результатам доверять не стоит.

Планшет необходимо покачивать в течение всего периода наблюдения, в противном случае эритроциты могут оседать по краям капли, что ошибочно принимается за их агглютинацию.

Мнение эксперта
Ковалева Елена Анатольевна
Врач-Лаборант. Опыт работы в клинико-диагностической службе 14 лет.
Задать вопрос эксперту
Определение группы крови может быть затруднено при некоторых тяжелых заболеваниях, когда изменяются свойства эритроцитов. Так при болезнях печени и селезенки, сепсисе, пневмонии, ожогах эритроциты могут стать настолько склонными к агглютинации, что склеиваются даже в сыворотке крови или в физиологическом растворе (так называемая панагглютинация).

Напротив, при лейкозах происходит снижение агглютиногенных свойств эритроцитов, и они могут не вступать в реакцию даже при применении реагентов высокой активности, такое наблюдается также у новорожденных детей. У некоторых групп лиц, таких как близнецы и пациенты, перенесшие пересадку костного мозга или многочисленные переливания некорректно подобранной крови, возникает редкое явление, называемое кровяной химерой.

Это означает, что в их организме сосуществуют эритроциты, относящиеся к разным группам крови. Исследование крови таких людей представляет немалую сложность. Поэтому в случае неясного результата анализа кровь лучше подвергнуть более точному исследованию в условиях лаборатории.

Определение группы крови — важнейшее исследование, где от точности полученного результата зависит жизнь пациента. При переливании неправильно подобранной крови развиваются тяжелые осложнения от лихорадки до повреждения легких и летального исхода, ведь реакция агглютинации, наблюдаемая нами на планшете, произойдет непосредственно в организме реципиента.

Поэтому результаты экспресс-исследования с помощью цоликлонов, которое может быть произведено непосредственно при заборе крови в процедурном кабинете, требуют подтверждения лабораторными методами в специализированной лаборатории.

Мнение эксперта
Ковалева Елена Анатольевна
Врач-Лаборант. Опыт работы в клинико-диагностической службе 14 лет.
Задать вопрос эксперту
Помимо группы крови там определят резус-фактор, c-белок и другие антигены, позволяющие подобрать кровь для переливания максимально точно. Однако в случае, если показания для проведения анализа не столь серьезны, например, человек хочет знать результат для соблюдения диеты по группе крови, метода цоликлонов будет вполне достаточно.

Сегодня определение группы крови цоликлонами становится все более частым благодаря простоте и точности методики при правильном соблюдении алгоритма исследования. Если раньше такой анализ был доступен лишь в профильном стационаре, то теперь многие лаборатории отказываются от других, более сложных методов, в пользу цоликлонов.

При желании узнать свою группу крови вы можете сделать это в поликлинике по месту жительства с соответствующим направлением от терапевта либо в частном медицинском центре. Владея минимальными медицинскими навыками и имея в своем распоряжении цоликлоны, вы можете провести такое исследование и в домашних условиях, но в этом случае нужно особо строго отнестись к соблюдению правил асептики и антисептики.

Автор статьи
Ковалева Елена Анатольевна
Врач-Лаборант. Опыт работы в клинико-диагностической службе 14 лет.
Написано статей
22

Так же читайте:


Если у вас есть вопросы, оставьте их ниже - мы обязательно ответим вам!

На ваши вопросы отвечает Ковалева Елена Анатольевна.
Врач-Лаборант.
Опыт работы в клинико-диагностической службе 14 лет.

Оставить комментарий или вопрос

avatar
wpDiscuz
Вам это будет интересно
>