Определение группы крови — важное лабораторное исследование, которое показано людям перед любыми операциями, а также беременным, военным, водителям транспортных средств и другим группам лиц, которым в любое время может потребоваться переливание крови.
Существует много техник проведения этого анализа, но самым быстрым и простым способом считается определение группы крови с помощью цоликлонов.
Принцип действия цоликлонов
Цоликлоны — специальные реагенты для определения группы крови, которые были разработаны в Центральном Ордена Ленина Институте Переливания Крови в Москве (ЦОЛИПК), откуда и получили свое название. Их изобретение позволило отказаться от более сложного и времязатратного метода стандартных сывороток.
Для того, чтобы понять, как работают цоликлоны, необходимо знать, чем группы крови отличаются друг от друга. В основе их различия лежит наличие или отсутствие на поверхности эритроцитов особых веществ, называемых агглютиногенами.
Всего существует два типа агглютиногенов, которые обозначаются буквами A и B.
У людей с первой группой крови агглютиногенов нет вообще, поэтому ее обозначают цифрой 0. Вторая группа крови подразумевает наличие агглютиногена A и обозначается соответствующей буквой.
Подобным же образом присутствие агглютиногена B относит кровь к третьей (B) группе. Ну а если в крови человека содержатся сразу оба агглютиногена, то ее обозначают буквами AB и называют четвертой.
Именно на основе этой несложной схемы разработан принцип действия цоликлонов.
Цоликлоны — это жидкости, содержащие вещества, которые способны вступать в реакцию с тем или иным агглютиногеном и вызывать при этом свертывание исследуемой крови. Цоликлон, показывающий таким образом наличие агглютиногена A, называется Анти-A и имеет красный цвет.
Вторая жидкость, способная сворачивать кровь с агглютиногеном B, является цоликлоном Анти-B и имеет синюю окраску. Существует также бесцветный цоликлон Анти-AB, представляющий собой смесь Анти-A и Анти-B цоликлонов и необходимый в некоторых случаях для подтверждения полученного результата. Жидкости выпускаются в стеклянных флаконах либо в пластиковых с капельницей, что облегчает их использование.
Алгоритм действий при анализе
Для проведения анализа на группу крови с помощью цоликлонов понадобится только планшет (любая чистая плоская пластина достаточного размера, например, тарелка), цоликлоны и две капли крови.
Для проведения исследования подходит почти любая кровь: взятая в консервант или без консерванта, из вены или из пальца.
Прежде чем начать работу, нужно пометить на планшете, с какой стороны какой цоликлон будет нанесен, иначе есть риск спутать их результаты.
Затем необходимо нанести по одной большой капле каждого цоликлона (Анти-A обычно капают с левой стороны, а Анти-B — с правой). Далее к каждой капле добавляют по одной небольшой капле крови. Капля крови должна быть примерно в 10 раз меньше по размеру, чем капля цоликлона. После этого планшет нужно аккуратно покачать, чтобы жидкость и кровь перемешались, но так, чтобы разноименные цоликлоны не смешались между собой.
При наблюдении за результатом анализа в течение нескольких минут можно увидеть либо равномерное перемешивание крови и цоликлона, либо реакцию агглютинации, то есть склеивания эритроцитов и свертывания крови. В этом случае становится видно, как эритроциты сначала соединяются в мелкие комочки, а затем выпадают хлопьями. Остается только интерпретировать полученные результаты.
- Реакция агглютинации не произошла ни в одной из капель — определяется первая (0) группа крови
- Кровь свернулась только с цоликлоном Анти-A — на планшете вторая (A) группа
- Свертывание крови произошло в капле с Анти-B — мы исследовали кровь третьей (B) группы
- Эритроциты выпали в осадок при соприкосновении с обоими цоликлонами — мы имеем дело с четвертой (AB) группой крови.
Однако в этом случае следует подтвердить полученный результат двумя дополнительными пробами. Для начала каплю исследуемой крови смешивают с цоликлоном Анти-AB, произошедшая при этом реакция агглютинации подтвердит наличие агглютиногенов A и B в исследуемой крови.
Также следует исключить неспецифическое склеивание эритроцитов, которое проявляется в агглютинации кровяных телец в любом растворе и возникает при некоторых тяжелых заболеваниях. Для этого каплю крови смешивают с обычным физиологическим раствором натрия хлорида, отсутствие реакции подтвердит четвертую (AB) группу крови.
Важные моменты
Метод определения группы крови с помощью цоликлонов является достаточно точным. Неверные результаты анализа чаще всего бывают вызваны ошибками, допущенными при его проведении. Для того, чтобы избежать их, необходимо учитывать несколько важных моментов.
- Цоликлоны обязательно должны храниться в холодильнике при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия. Более того, вскрытый флакон можно хранить там только в течение месяца, плотно закрытым. При несоблюдении этого правила реагенты могут поменять свои свойства, поэтому нельзя использовать просроченные или неправильно хранившиеся цоликлоны.
- Анализ должен проводиться при хорошем освещении и температуре воздуха в помещении от 15 до 25 градусов. Если жаркая погода не позволяет соблюсти нужный температурный режим, то исследование необходимо провести на охлажденном планшете.
- Необходимо четко знать, в какой капле находится цоликлон Анти-A, а в какой — Анти-B, именно для этого планшет обязательно следует подписать маркером или карандашом по стеклу. Несмотря на то, что жидкости различаются по цвету, после смешивания с кровью это отличие становится не так очевидно, и есть риск запутаться.
- Капля крови не должна быть слишком большой или маленькой, идеальное соотношение крови и цоликлона 2:10 — 3:10. При слишком большом количестве эритроцитов реакция агглютинации может быть недостаточно заметной, а при недостатке она будет происходить очень медленно.
- Жидкости из двух исследуемых капель ни в коем случае не должны соприкасаться между собой. Если это все же произошло, нужно провести исследование заново.
- Если вы используете стеклянные палочки для смешивания крови и цоликлона, то они должны быть индивидуальными для каждой капли.
- Продолжительность наблюдения за реакцией агглютинации должна быть не менее 3 минут, а при возникающих сомнениях — все 5. Несмотря на то, что склеивание эритроцитов происходит уже в течение первых 10 секунд, не стоит делать поспешные выводы, увидев агглютинацию в одной из капель.
Продолжив наблюдение, вы можете, к своему удивлению, заметить замедленную реакцию и со вторым цоликлоном, если у исследуемой крови есть свои особенности. Однако по прошествии слишком большого времени может произойти подсыхание крови и естественное оседание эритроцитов, поэтому таким результатам доверять не стоит.
Планшет необходимо покачивать в течение всего периода наблюдения, в противном случае эритроциты могут оседать по краям капли, что ошибочно принимается за их агглютинацию.
Напротив, при лейкозах происходит снижение агглютиногенных свойств эритроцитов, и они могут не вступать в реакцию даже при применении реагентов высокой активности, такое наблюдается также у новорожденных детей. У некоторых групп лиц, таких как близнецы и пациенты, перенесшие пересадку костного мозга или многочисленные переливания некорректно подобранной крови, возникает редкое явление, называемое кровяной химерой.
Это означает, что в их организме сосуществуют эритроциты, относящиеся к разным группам крови. Исследование крови таких людей представляет немалую сложность. Поэтому в случае неясного результата анализа кровь лучше подвергнуть более точному исследованию в условиях лаборатории.
Определение группы крови — важнейшее исследование, где от точности полученного результата зависит жизнь пациента. При переливании неправильно подобранной крови развиваются тяжелые осложнения от лихорадки до повреждения легких и летального исхода, ведь реакция агглютинации, наблюдаемая нами на планшете, произойдет непосредственно в организме реципиента.
Поэтому результаты экспресс-исследования с помощью цоликлонов, которое может быть произведено непосредственно при заборе крови в процедурном кабинете, требуют подтверждения лабораторными методами в специализированной лаборатории.
Сегодня определение группы крови цоликлонами становится все более частым благодаря простоте и точности методики при правильном соблюдении алгоритма исследования. Если раньше такой анализ был доступен лишь в профильном стационаре, то теперь многие лаборатории отказываются от других, более сложных методов, в пользу цоликлонов.
При желании узнать свою группу крови вы можете сделать это в поликлинике по месту жительства с соответствующим направлением от терапевта либо в частном медицинском центре. Владея минимальными медицинскими навыками и имея в своем распоряжении цоликлоны, вы можете провести такое исследование и в домашних условиях, но в этом случае нужно особо строго отнестись к соблюдению правил асептики и антисептики.
Оставить комментарий или вопрос